睿科 “固相萃取 + 氮吹濃縮”：禽蛋阿維菌素殘留測定解決方案來了！
阿維菌素類藥物是從鏈霉菌的發(fā)酵產(chǎn)物中分離出來的大環(huán)內(nèi)酯類殺蟲劑，對動植物的寄生線蟲和節(jié)肢動物均有高效的驅(qū)殺作用。這類藥物包括阿維菌素、伊維菌素、多拉菌素、莫西菌素、乙酰氨基阿維菌素等。由于化學(xué)結(jié)構(gòu)新穎，作用機(jī)制獨(dú)特，并具有廣譜、高效、低殘留和對人畜及環(huán)境較安全等特點(diǎn)，是目前應(yīng)用最廣泛的抗寄生蟲藥物，但長期攝入阿維菌素類藥物超標(biāo)的食品可能會麻痹人的神經(jīng)系統(tǒng)，也有可能會損害到消化系統(tǒng)。
2025年9月1日起，33項(xiàng)獸藥殘留檢測方法食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)開始實(shí)施，其中就包括GB 31659.13-2025《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 禽蛋中阿維菌素類藥物殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》。本方案參考上述標(biāo)準(zhǔn)，將試樣中殘留的阿維菌素類藥物用酸化乙腈提取，HLB固相萃取柱凈化，氮吹濃縮，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定，外標(biāo)法定量。
圖-1 阿維菌素類藥物結(jié)構(gòu)式
1.儀器和耗材
儀器
Raykol Fotector Plus全自動固相萃取儀
Raykol EVA 80 全自動氮吹濃縮儀
耗材
HLB固相萃取柱（150 mg/3 mL）
試劑
乙腈（色譜純）
甲酸（色譜純）
超純水
鹽析包:含４g氯化鈉和１g無水硫酸鎂
2.樣品制備
稱取均質(zhì)后的雞蛋液５g于50mL離心管中，加入超純水５mL并渦旋混合30s后，準(zhǔn)確加入1%甲酸乙腈溶液10 mL,振蕩15 min。加入含4 g氯化鈉和1 g無水硫酸鎂的鹽析包,渦旋1 min，4000r/min離心10 mi，取上層乙腈相，備用。
2.1凈化與濃縮
將HLB固相萃取柱置于Fotector Plus全自動固相萃取儀上，取2 mL備用液過柱，流速設(shè)置為1 mL/min，收集流出液，并用1 mL乙腈淋洗固相萃取柱，收集淋洗液，氣推推干小柱。將所有收集液用EVA 80全自動氮吹濃縮儀在40 ℃下吹干。準(zhǔn)確加入50%乙腈水溶液1.0 mL，渦旋1 min溶解殘余物，超聲1 min，過0.22μm微孔尼龍濾膜，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定。具體固相萃取方法設(shè)置見圖-2。
2.2固相萃取凈化條件
圖-2 Fotector Plus固相萃取方法
3.1液相條件
3.2液相梯度洗脫條件
3.3質(zhì)譜儀器參數(shù)
3.4 MRM參數(shù)
3.5 TIC圖
（1:乙酰氨基阿維菌素B1a；2:阿維菌素B1a；3:多拉菌素；4:莫昔克丁；5:22,23-二氫阿維菌素B1a）
圖-3 阿維菌素類藥物(1μg/L)的TIC譜圖
4.結(jié)果與討論
為了驗(yàn)證該方法的回收率，本實(shí)驗(yàn)于雞蛋樣品中加入5種阿維菌素類藥物混合標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行加標(biāo)回收驗(yàn)證(上機(jī)濃度5 μg/kg，n=6)，數(shù)據(jù)如表-1所示。加標(biāo)平均回收率在76.9%~105.8%之間，RSD值控制在15%以內(nèi)，說明該方案能夠較好地運(yùn)用于雞蛋中阿維菌素類藥物殘留量的檢測。
表-1 雞蛋樣品加標(biāo)回收率及RSD值（n=6）
5.總結(jié)
本解決方案操作方便、凈化和濃縮效率高、回收率滿足GB 31659.13-2025《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 禽蛋中阿維菌素類藥物殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》的質(zhì)控要求。Fotector Plus高通量全自動固相萃取儀采用全自動操作，可以排除人員操作帶來的誤差，從活化到上樣、洗脫一步到位，六通道同時進(jìn)行；同時Fotector Plus能夠?qū)崿F(xiàn)高通量處理，最多一天能夠處理180個樣品，省時省力。EVA 80系列全自動氮吹濃縮儀可自動完成樣品的濃縮，采用氮吹針追隨的方式使得濃縮進(jìn)程更快，并節(jié)省氮?dú)猓嬲秊榕繖z測提供幫助。
